生物素標記辣根過氧化物酶是一種廣泛應用于生物化學實驗中的分子探針,特別是在免疫學和分子生物學研究中。它結合了辣根過氧化物酶的酶活性與生物素這一高親和力的分子標記物,具有高靈敏度和可擴展性,廣泛應用于酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、免疫組織化學染色、Westernblot等實驗中。

1.生物素化反應:使用生物素化試劑(如生物素-NHS酯)將生物素分子與HRP的氨基酸殘基(通常是賴氨酸)發生反應,從而將生物素分子共價附著到HRP上。
2.HRP-Biotin純化:生物素化后的HRP通過色譜技術(如親和層析)進行純化,以去除未反應的試劑和副產物,獲得高純度的HRP-Biotin。
3.應用機制:在應用中,HRP-Biotin常常作為檢測探針。其工作原理為:HRP通過催化底物生成可檢測產物(如顯色反應或發光反應),而生物素分子則通過與親和素或鏈霉親和素結合,形成穩定的復合物,進一步增強信號的特異性和靈敏度。
生物素標記辣根過氧化物酶的優點:
1.高靈敏度:HRP具有高效的催化作用,可以在低濃度下提供強信號,因此生物素標記HRP非常適用于需要高靈敏度的實驗。
2.特異性:生物素與親和素的結合力強,能夠提供高特異性的檢測結果,減少背景噪聲。
3.多功能:HRP-Biotin可以與多種檢測系統結合,如顯色、發光或熒光反應,具有很高的適應性。
4.廣泛應用:HRP-Biotin廣泛應用于多種實驗,包括免疫檢測、蛋白質分析、基因表達研究等。