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活細胞/死細胞雙染試劑盒的檢測原理

更新時間:2026-01-27      瀏覽次數(shù):93

一、產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱:活細胞/死細胞雙染試劑盒

規(guī)格:500T(以96孔板為例)

保存:-20℃避光干燥保存,有效期1年。


二、產(chǎn)品組成:

名稱

500T

保存

Calcein-AM Solution(2mM)

50μL

-20℃避光干燥保存

PI Solution(1.5 mM)

150μL

-20℃避光干燥保存

10×Assay Buffer

50mL

-20℃保存,經(jīng)常使用可放在2-8℃保存








三、產(chǎn)品說明(僅供參考):

Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標(biāo)記的細胞染色試劑發(fā)綠色熒光(Ex=490nm,Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團,增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein,從而被滯留在細胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AMCFDA)相比,由于Calcein-AM細胞毒性極低,是最-適-合用于活細胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。

由于死細胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidiumiodide,PI)不能穿過活細胞的細胞膜,僅能穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核,并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535nm,Em=617nm),因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545nm激發(fā),僅可觀察到死細胞。

本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料,來進行活細胞和死細胞的雙重染色標(biāo)記,從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實驗體系,單次就100µL細胞懸液進行染色,可以做500次檢測。


該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。



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